实时热搜: 构建质粒热激后加了抗性培养基摇3个小时有影响吗

转化42度热激完为什么要迅速转移至冰上 构建质粒热激后加了抗性培养基摇3个小时有影响吗

35条评论 169人喜欢 3256次阅读 565人点赞
转化42度热激完为什么要迅速转移至冰上 构建质粒热激后加了抗性培养基摇3个小时有影响吗 热激时间质粒转化时先在冰中放置半小时后再42度热激的原因: 热激法:大肠杆菌在0℃ CaCl2低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热冲击处理,促进细胞吸收DNA复合物,在丰富培养基

热激法转质粒时为什么一定要精确控制温度和时间,...没有理由; 这些只是根据大量实验优化出来的最佳条件而已; 你可以试试看,就算不是这些条件也可以转化出来,只是效率可能会将低而已。

分子克隆高手请进: 转化时,热激时间过长的影响。最佳热激时间是90s,我一忙别的忘了这茬,结果热激了能有2分钟的时间。过长会导致感受态死亡,两分钟不算严重,转化效率较高的话,应该还是能出来阳性菌落的

转化感受态细胞时 热激后冷却时间长 会有怎样影响蓝白筛选的原理:质粒如pUC18上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和头146个氨基酸(N端),而大肠杆菌的lac-突变型DH5α可编码β-半乳糖苷酶的C端,单独表达这两个片段均无β-半乳糖苷酶活性,同时表达两个片段可融和(α互补)形成具有酶活性。

转化感受态细胞时 ,热激后冷却时间长 会有怎样影响个人感觉热激后冰浴时间长点没有什么关系吧

除了热激转化法还有什么转化方法通过转化将载体DNA导入受体菌继而得到含有目的DNA插入的转化菌株是构建DNA文库最为关键的一步 化学法(化学药物如氯化钙等)转化 氯化钙法转化细胞 细菌处于0℃及CaCl2低渗溶液中时,菌细胞膨胀成球形转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复

感受态细胞转化时,热击后需冷却5分钟的原因或者好...化转时,感受态细胞膜由于吸附阳离子(Ca2+等)呈液晶状态,受到热激后,细胞膜出现裂隙,外源DNA进入细胞,此时细胞非常脆弱,将其冰浴冷却,细胞膜修复闭合,

构建质粒热激后加了抗性培养基摇3个小时有影响吗我犯过这个错误,用的是DH5α,可能是转化效率过低的缘故转化子数目较少而且几乎没有蓝斑,但是还是挑出了想要的克拢

在质粒转化大肠杆菌的实验中,在热激以后为什么要...准确地说,细菌就算软入重组质粒,质粒上的抗性基因也不能马上表达,所以细胞还不具有抗性,细胞比较脆弱,不能在复苏时加抗生素,否则,细菌都死掉了。。。

转化42度热激完为什么要迅速转移至冰上质粒转化时先在冰中放置半小时后再42度热激的原因: 热激法:大肠杆菌在0℃ CaCl2低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热冲击处理,促进细胞吸收DNA复合物,在丰富培养基

404